美Agena 核酸質(zhì)譜分析系統(tǒng) MassARRAY

---全球**核酸質(zhì)譜高精度DNA定性定量分析平臺(tái)

技術(shù)特點(diǎn)：

本系統(tǒng)的突出特點(diǎn)是以極高的精確度和極快的速度，一次性掃描384個(gè)樣本中的多達(dá)40個(gè)SNP位點(diǎn)。首先進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增，然后有經(jīng)過修飾的ddNTP作單堿基引物延伸，使質(zhì)譜能夠準(zhǔn)確識(shí)別堿基，并依據(jù)峰面積報(bào)告每個(gè)堿基的頻率。因此能夠準(zhǔn)確分析樣本中的等位基因分布頻率，適用于遺傳性疾病檢測和體細(xì)胞突變檢測以及鑒別一個(gè)體的正常或腫瘤組織。MassARRAY 反應(yīng)體系不需要雜交，可避免雜交錯(cuò)配干擾，也不需要熒光標(biāo)記。其采用的高密度SpectroCHIP 芯片能在8小時(shí)內(nèi)完成3840個(gè)樣本的多重SNP鑒定，全自動(dòng)分析結(jié)果，不受人為因素干擾。訪系統(tǒng)分為96孔和384孔2種不同通量和3種儀器型號(hào)供用戶靈活選擇，可滿足用戶低，中，高不同通量的使用需求。該系統(tǒng)的上市及時(shí)提供了從低到高不同規(guī)模的高效率和高質(zhì)量檢測SNP的技術(shù)平臺(tái)，順應(yīng)了當(dāng)前醫(yī)學(xué)疾病基因組疾病機(jī)制研究和臨床診斷檢測迅猛發(fā)展的趨勢。

技術(shù)原理

核酸質(zhì)譜主要通過單堿基延伸和分子切割的兩種生物化學(xué)技術(shù)實(shí)現(xiàn)。

iPLEX SNP 基因型分析

Assay Designer 軟件對SNP的80-150bp區(qū)域設(shè)計(jì)多重PCR引物，并對SNP位點(diǎn)設(shè)計(jì)單堿基延伸引物。PCR擴(kuò)增處理：5ul體系做1-40重反應(yīng)，45個(gè)循環(huán)；產(chǎn)物經(jīng)蝦堿性磷酸酶（SAP)處理。單堿基延伸擴(kuò)增不同長度的1-40條引物，用ddNTP作用堿基延伸，200個(gè)循環(huán)。DNA質(zhì)譜檢測和數(shù)據(jù)分析精確區(qū)分4種堿基的分子量，并自動(dòng)報(bào)告其生物結(jié)果。

EpiTYPER DNA 甲基化分析

亞硫酸鹽將未甲基化的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)槟蜞奏ぃ琍CR擴(kuò)增和SAP處理用反鏈5端帶T7啟動(dòng)的引物擴(kuò)增500bp， 產(chǎn)物經(jīng)蝦堿性磷酸酶（SAP)處理，體外轉(zhuǎn)錄將DNA轉(zhuǎn)錄為PRA， 堿基特異性酶切酶切T后， DNA 片段的分子量取決于亞硫酸鹽處理后的堿基變化。