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Pure系統以更大的回收率
純化根莖川芎提取物中的阿魏酸
Pure 應用
1
介紹
藥用植物是藥物開發的重要資源。在生物化學，制藥及臨床研究中通常會分析它們的復雜成分及生物活性成分。眾所周知，阿魏酸是在根莖川芎中發現的最主要的生物活性成分「1」。使用 Pure Flash 色譜系統分離純化該植物提取物，并鑒定其中的稀有成分。
2
實驗條件
萃取條件 | ||
萃取類型 | 研磨 | |
重量 | 2g | |
萃取溶劑 | 乙醚 | |
溶劑體積 | 40ml | |
超聲波提取 | 20min | |
Flash 色譜條件 | ||
色譜柱 | Slica 12g | |
進樣模式 | 液體 | |
溶劑A | 正己烷 | |
溶劑B | 乙酸乙酯 | |
UV1 | 280nm | |
UV2 | 254nm | |
流速 | 25ml/min | |
ELSD載氣 | 空氣 | |
柱平衡 | 3.0min | |
流動相條件 | ||
步驟 | 時間 | %B |
1 | 0.0 | 0 |
2 | 3.0 | 5 |
3 | 8.8 | 5 |
4 | 0.5 | 6 |
5 | 2.6 | 33 |
6 | 5.2 | 98 |
7 | 2.6 | 98 |
Flash 分離結果 |
▲ 圖1：對根莖川芎提取物的分離說明使用紫外檢測器和蒸發光散射檢測器可以對峰進行檢測。
分析型 HPLC 色譜條件 | ||
色譜柱 | AlltimaTM 硅膠柱,5μm,250×4.6 mm | |
進樣模式 | 液體 | |
溶劑A | 正己烷+1%甲酸 | |
溶劑B | 乙酸乙酯+1%甲酸 | |
UV1 | 280nm | |
流速 | 1.0ml/min | |
流動相條件 | ||
步驟 | 時間 | %B |
1 | 0.0 | 0 |
2 | 10.0 | 50 |
3 | 20.0 | 100 |
分析型 HPLC 分離結果 |
▲ 圖2：阿魏酸回收率 =97%(用峰面積來計算)
3
結論
使用高靈敏度的 Pure Flash 色譜系統，對低含量植物萃取物中的重要成分進行分離和收集。在同一運行過程中，可以使用 UV 檢測器檢測發色團的峰和 ELSD 技術來檢測非發色團的峰，進行餾分收集和進一步分析。這樣可以純化天然產物提取物中的化合物和不容易用傳統 Flash 色譜系統檢測的低含量的有藥效的化合物。
4
參考文獻
Chen, X.; Kong, L.; Su, X.; Fu, H.; Ni, J.; Zhao, R.; Zou, H.; Separation and identification of compounds in Rhizoma chuanxiong by comprehensive two-dimensional liquid chromatography coupled to mass spectrometry; J. Chromatograpy A, 1040, (2004), pp. 169-178.
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