“天然的保肝藥” 都是怎么來的？

水飛薊素被成為“天然的保肝藥”，是從菊科植物水飛薊的干燥果實中提取而得到的一種黃酮木脂素類化合物。該類化合物具有清除自由基，抗脂質過氧化，保護肝細胞膜，促進肝細胞修復再生，抗肝纖維化，降血脂等效果。

黃酮類化合物（flavonoids），原是指以2-苯基色原酮為骨架衍生的一類化合物的總稱。現泛指兩個苯環通過三個碳原子相互連接而成的一系列化合物的總稱，即具有C6-C3-C6結構的一類化合物的總稱。大量研究表明黃酮類化合物還具有降壓、降血脂、抗衰老、提高機體免疫力、瀉下、鎮咳、祛痰、解痙及抗變態等藥理活性。

1 介紹

本文中將會介紹一種簡便、可靠的方法，用來測定金盞菊中黃酮類化合物含量的應用。黃酮類化合物是多酚類次生代謝產物，對人體的生物利用度較低。一旦被吸收，黃酮類化合物被迅速代謝，產生具有抗炎、氧化、血栓形成、糖尿病和癌癥特性的代謝物。黃酮類化合物存在于水果，蔬菜，谷物，樹皮，根莖，花茶和葡萄酒中。在本文中，金盞菊粉末通過使用全頻固液萃取儀  E-800 用索氏熱萃取法提取，用紫外分光光度法測定黃酮類化合物的含量。

2 設備

• 固液萃取儀 E-800 pro

• 分析天平(精度 ±0.1mg)

• 紫外/可見分光光度計(PerkinElmer Lambda 25)

3 樣品和試劑

• 樣品：含花萼的金盞菊干粉，參考黃酮類含量：0.29%

• 試劑：丙酮，六水氯化鋁，甲醇 HPLC，六亞甲基四胺純化物，無水硫酸鈉，去離子水

4 實驗流程

黃酮類含量的測定包括以下步驟:分別用丙酮和酸水解同時提取和分解，形成黃酮類苷。黃酮類苷以結合態（黃酮苷）或自由態（黃酮苷元）形式存在，乙酸乙酯液液萃取黃酮類苷元，紫外/可見分光光度法測定黃酮類含量。

1. 樣品制備

• 將萃取紙濾筒放入索氏萃取腔中

• 稱取 0.8g 均質樣品到紙濾筒中

• 在樣品上加入 1.0mL 試劑

• 在紙濾筒內加入 7.0mL 鹽酸（濃度37%)

2. 使用表1中參數設置用 E-800 進行提取

表1：UniversalExtractor E-800 的索氏熱萃取參數

3. 液液萃取

將提取液轉移到 100ml 的容瓶中。將所得溶液 20ml 轉移到分離漏斗中，加入 20ml 去離子水，用乙酸乙酯洗滌溶液，進行液-液萃取。收集有機相用 2x50mL 去離子水洗滌，用無水硫酸鈉干燥后過濾有機相，將液體直接轉移到 50ml 容量燒瓶中。

4. UV / Vis分光光度法

試驗溶液:取 10.0 mL 原液，加入 1mL 氯化鋁試劑，用 5% 冰醋酸在甲醇中稀釋至 25.0mL。30 分鐘后，測定測試溶液的吸光度，并在 425nm 處進行比較。

5. 計算

以金絲桃苷表示的黃酮百分比含量按式計算。

金絲桃苷的吸光度為 500 (1%，d=1cm)

5 結果

金盞菊樣品被分成三份分析。測定的黃酮類化合物含量與參考值 0.29% 吻合較好。由于黃酮類化合物含量低，小的偏差導致較高的相對標準偏差。因此，定義了 5% 的相對標準偏差。結果如表2所示。

表2:金盞菊提取物類黃酮含量測定結果

6 結論

采用全頻固液萃取儀 E-800 對金盞菊粉末中黃酮類化合物的含量進行測定，結果可靠，重復性好。與文獻中描述的方法進行了比較。省略了提取過程中的費力步驟，獲得更高的黃酮類化合物含量，殘留損失較少，使用全自動萃取儀成功完成實驗。步琦助力研究人員進行各類天然產物的提取與分析，提供更高效便捷、更人性化、更對自然友好的解決方案。

▲E-800萃取儀