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動物細胞破碎技術和高速膠體磨的解決辦法 ,細胞破碎技術,多糖提取 ,組織勻漿
細胞破碎技術是指利用外力破壞細胞膜和細胞壁,使細胞內容物包括目的產物成分釋放出來的技術,是分離純化細胞內合成的非分泌型生化物質(產品)的基礎。結合重組DNA技術和組織培養技術上的重大進展,以前認為很難獲得的蛋白質現在可以大規模生產。
由于細菌、酵母、真菌、植物都有細胞壁,但成分不同,且同類細胞結成的網狀結構不同,因此其細胞壁的堅固程度不同,總體呈現遞增態勢。
動物細胞雖沒有細胞壁,但具有細胞膜,也需要一定的細胞破碎方法來破膜,達到提取產物的目的。
細胞破碎的方法主要分為化學法和機械法兩大類。具體如下:
化學法
滲透沖擊破碎法
? 方法:滲透壓沖擊是較溫和的一種破碎方法,將細胞放在高滲透壓的溶液中(如一定濃度的甘油或蔗糖溶液),由于滲透壓的作用,細胞內水分便向外滲出,細胞發生收縮,當達到平衡后,將介質快速稀釋,或將細胞轉入水或緩沖液中,由于滲透壓的突然變化,胞外的水迅速滲入胞內,引起細胞快速膨脹而破裂。
反復凍融法
? 方法:將細胞放在低溫下冷凍(約-15℃),然后在室溫中融化,反覆多次而達到破壁作用。由于冷凍,一方面能使細胞膜的疏水鍵結構破裂,從而增加細胞的親水性能,另一方面胞內水結晶,形成冰晶粒,引起細胞膨脹而破裂。對于細胞壁較脆弱的菌體,可采用此法。
酶溶破碎發法
? 方法:利用各種水解酶,如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶、半纖維素酶、脂酶等,將細胞壁分解,使細胞內含物釋放出來。有些細菌對溶菌酶不敏感,加入少量巰基試劑或8摩爾尿素處理后,使之轉為對溶菌酶敏感而溶解。
? 特點:
a) 此法適用多種微生物
b) 具有作用條件溫和
c) 內含物成分不易受到破壞
d) 細胞壁損壞的程度可以控制
? 存在的問題:
a) 易造成產物抑制作用
b) 溶酶價格高
c) 酶溶法通用性差
化學試劑法
? 方法:某些有機溶劑(如苯、甲苯)、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學藥品都可以改變細胞壁或膜的通透性從而使內含物有選擇地滲透出來。SDS(十二烷基磺酸鈉)是典型的陰離子表面活性劑
? 特點:提取核酸時,常用此法破碎細胞。
? 存在的問題:
a) 時間長,效率低;
b) 化學試劑毒性較強,同時對產物也有毒害作用
通用性差:某種試劑只能作用于某些特定類型的微生物細胞。
方法 | 技術 | 原理 | 效果 | 成本 | 應用 |
化學法 | 滲透沖擊 | 滲透壓破壞細胞 | 溫和 | 便宜 | 動物組織均質物或細胞懸液 |
酶消化法 | 細胞壁被消化,使細胞破碎 | 溫和 | 昂貴 | 細菌或酵母 | |
增溶法 | 表面活性劑溶解細胞壁 | 溫和 | 適中 | 動物或植物組織均質物,提取DNA | |
脂溶法 | 有機溶劑溶解細胞壁并使之失穩 | 適中 | 便宜 | 動物或植物組織均質物,提取DNA | |
堿處理法 | 堿的皂化作用使細胞壁融解 | 劇烈 | 便宜 | 菌液質粒DNA提取,RNA提取 |
一般企業是多破碎,先物理破壁,然后化學凍融來組合破壁提高收率
由于 動物 一般是 分級破碎,
目前市場上大多數的膠體磨廠家生產出來的膠體磨轉速只能達到3000rpm左右,當然我所說的都是指工業化的膠體磨機。對于實驗室小型膠體磨機,由于電機(220V),軸等因素轉速可達30000rpm左右,但是這種實驗室膠體磨無法對應放大到生產中,所以在這里不做重點講訴。
3000轉膠體磨的結構大都都是直連電機,膠體磨機的主軸和電機直連,電機就決定了主軸的轉速。而進口膠體磨采用分體式結構,通過皮帶進行變速,XX設備由于結構的設計缺失、機械密封技術的不足的原因,以及改進后成本大幅度的提高問題,一直無法實現高速膠體磨機的自主研發和生產。
當用我們的設備好處是什么?效果好(研磨效果、均質效果、分散效果、乳化效果……),速度快,效率高。每一臺設備都具有多功能改裝,根據不同的要求更換不同的模塊。還有什么???那就是能耗低,據用過依肯的設備客戶反應,就電費就能省下不少。如何去選擇一臺合適的設備,一定會做一個明智的選擇!
在線式高速膠體磨優點
1 CMS2000系列作為一個用于混合分散粉碎工藝的設備,其具有連續式性操作,因此也被稱作連續式超高速粉碎機,能夠更好滿足大批量連續化生產作業要求.
1分散乳化粉碎效率高:批次乳化機在進行乳化前往往需要預攪拌,在其基礎上才能實現較好的分散乳化混合效果.因此所需要時間更多,產量更小.適用于不連續生產或者產量較小的生產.而連續式膠體磨機可以直接進行投料,更短時間能夠實現混合分散的顆粒經的要求.產量大效率高,適用于連續式生產,產量更大的情況.
2分散效粉碎果好:其他粉碎設備在罐體內,物料與粉碎頭較松散,工作時依靠強大的吸力使物料進入分散頭中,不能實現足夠小的顆粒經要求。而連續式乳化機由于乳化腔體內部設計足夠小,膠體磨頭與物料緊密接觸,剪切充分,同時膠體磨腔體設計成多層轉定子咬合結構,優化粗齒結構,可以滿足混合乳化粉碎的顆粒經分布較窄,效率更高
3 技術功能指標更高:CMS2000系列管線膠體磨機比較在相同的馬達情況下,轉速有明顯優勢,CMS2000轉速可以達到14000RPM,可以在更短的惡時間內處理更多符合要求的物料,能夠為大批量生產的企業實現生產過程的成本降低。
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