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CytoSense GV型——可分析帶氣囊的浮游植物

有些浮游植物（如微囊藻）帶有氣囊。氣囊會改變光散射，從而會改變這類浮游植物的“光學指紋”。通過施加瞬間高壓可以打破氣囊，從而消除由于氣囊引起的光散射變化，修復“光學指紋”。通過兩次測量可以方便的區分出帶氣囊的種：**次直接測量，第二次施加高壓破壞氣囊后測量。那些在施加高壓后改變了光散射的種就是帶氣囊的種。

CytoSense的特殊版本——CytoSense GV型可以滿足上述要求。CytoSense GV型就是在CytoSense的基礎上增加一個高壓模塊。這個高壓模塊可以提供瞬間高壓用于破壞氣囊。這個過程可以由軟件自動完成。

CytoSense應用于高濁度水體的對策

針對我國很多水體濁度高、泥沙含量高的特點，根據國內用戶需求，澤泉科技有限公司與荷蘭CytoBuoy公司合作提出如下解決方案：

1）進樣篩選 水樣被進樣器采集后，在進樣器內部經過篩選排除空氣和砂粒（圖1）。進樣器內部設計非常獨特，從上到下有三個出水口，其中上邊的出水口用于排除空氣，多數砂粒由于沉降速率較大會經下部出水口排除，只有中間的出水口用于采集浮游植物、浮游動物和與它們密度相差不大的砂粒進行流式細胞計數和其它分析。

如果水中砂粒粒徑很大，可以在進樣器中增加一個不銹鋼篩網，用于濾除粒徑大于1 mm的泥沙顆粒。

對于多數粒徑大于50-100 um的砂粒而言，它們的沉降速率大于CytoSense的進樣流速（1-2 cm/s），因此不會被進樣器吸入。

2）外置鞘液系統

CytoBuoy系列浮游植物流式細胞儀（包括CytoSense、CytoBuoy和CytoSub）的一個重大創新就是不用外加鞘液，而是直接采用水樣的過濾液作為鞘液，這樣既節省了用戶的成本，也省去了更換鞘液的麻煩，同時還避免了流路發生生物污染的可能。但是由于樣品過濾生成的鞘液量不是很大，在測量高濁度水體樣品時，就難于避免水體中黃色物質發出的熒光的影響。另外，對于類似我國黃河水體、或者洪水期的長江水體而言，泥沙顆粒非常多，可能每100個顆粒中只有1－5個浮游植物細胞（甚至有可能每1000個顆粒中只有1個浮游植物細胞），其它都是泥沙顆粒，這極大增加了浮游植物計數的難度。但即使是這樣的水樣，CytoSense也是可以測量的。為了達到更好的分析效果，建議采用如下的外置鞘液系統。

外置鞘液系統的鞘液采用蒸餾水或市場上購買的桶裝水皆可。自來水由于含氯，對浮游植物活性有影響，因此不建議使用。其它類似PBS緩沖液等也可作為鞘液，只是比蒸餾水或桶裝水的獲取更麻煩，成本更高。鞘液桶采用容量20－30升的塑料桶即可。根據工作模式，可分為外置非循環鞘液系統和外置循環鞘液系統。

外置非循環鞘液系統（圖2）：鞘液一次性使用，用完即排出不在使用。連續工作1小時約需5升鞘液，工作1天約需50升鞘液。

外置循環鞘液系統（圖3）：鞘液使用后經循環過濾系統可重復利用，大大節省了鞘液用量。由于循環使用鞘液，水體樣品中的黃色物質會流入鞘液中，盡管被稀釋，但還是會產生微弱的熒光。因此建議鞘液桶足夠多（20－30升），以盡量降低黃色物質熒光引起的誤差。同時建議每天更換新的鞘液。

通過以上這些設計，CytoSense完全可以直接測量高濁度水體樣品（如洪水期的長江水樣、長江口水樣），可以對水中總顆粒進行計數。通過樣品是否發出熒光，可以區分浮游植物和其它顆粒。通過多色熒光，可以對浮游植物進行聚類分析。通過浮游植物專家庫，可以對多數非球狀西部鑒定到種。當然，如果結合GV模塊（自動破碎微囊藻的囊），還可以對微囊藻（不需預處理）直接測量。